Stopped Flow

Description et caractéristiques

La cinétique rapide permet d’étudier des réactions rapides en solution sur une échelle de temps de 1 milliseconde à plusieurs centaines de secondes. Différentes réactions peuvent être étudiées comme par exemple les interactions protéine-protéine, la fixation de ligands, les transferts d’électrons, le FRET, le repliement des protéines ou les réactions chimiques et enzymatiques.

Dans la majorité des expériences, deux réactifs sont rapidement mélangés puis «arrêtés» dans une cellule d’observation. La cellule échantillon est irradiée avec une lumière monochromatique et, au fur et à mesure de la réaction, le changement du signal (fluorescence, absorbance ou CD) à une longueur d'onde spécifique est enregistré en fonction du temps. L'analyse des cinétiques obtenues peut permettre de déterminer les vitesses de réaction et d’obtenir des informations sur les mécanismes de réactions complexes, sur les intermédiaires de réaction de courte durée de vie, etc. L'effet de différents paramètres tels que la température, le pH ou la concentration de réactif sur la cinétique d'une réaction peut être étudié en réalisant des séries de mesures.

Type
SX19 stopped-flow
Référence
Applied Photophysics
pf-biophysique

Accès et tarifs

  • Les analyses peuvent être réalisées en mode service ou collaboration en fonction des demandes et de l'implication des membres de la plateforme. Contacter le responsable à l'aide du formulaire de "Demande de prestation" pour plus de renseignements.

Publications

  • Lec J.C, Boutserin S, Mazon H, Mulliert G, Boschi-Muller S, Talfournier F. Unraveling the Mechanism of Cysteine Persulfide Formation Catalyzed by 3-Mercaptopyruvate Sulfurtransferases. ACS Catal. 2018 ; 8(3):2049–2059.

    logo DOI - Digital Object Identifier 10.1021/acscatal.7b02432 , logo HAL - Archives Ouvertes HAL-01715178
  • Rahuel-Clermont S, Bchini R, Barbe S, Boutserin S, André I, Talfournier F. Enzyme Active Site Loop Revealed as a Gatekeeper for Cofactor Flip by Targeted Molecular Dynamics Simulations and FRET-Based Kinetics. ACS Catal. 2019 ; 9 ; 1337−1346.

    logo DOI - Digital Object Identifier 10.1021/acscatal.8b03951 , logo HAL - Archives Ouvertes HAL-02022828
  • Beaussart A, Canonico F, Mazon H, Hidalgo J, Cianférani S, Le Cordier H, Kriznik A, Rahuel-Clermont S. Probing the mechanism of the peroxiredoxin decamer interaction with its reductase sulfiredoxin from the single molecule to the solution scale. Nanoscale Horiz. 2022 Mar 2.

    logo DOI - Digital Object Identifier 10.1039/d2nh00037g , Logo PMID - PubMed 35234779 , logo HAL - Archives Ouvertes HAL-03595966
  • Bersweiler A, D'Autréaux B, Mazon H, Kriznik A, Belli G, Delaunay-Moisan A, Toledano MB, Rahuel-Clermont S. A scaffold protein that chaperones a cysteine-sulfenic acid in H(2)O(2) signaling. Nat Chem Biol. 2017 Aug ; 13(8):909-915.

    logo DOI - Digital Object Identifier 10.1038/nchembio.2412 , Logo PMID - PubMed 28628095 , logo HAL - Archives Ouvertes HAL-01652643